免疫共沉淀又叫Co-IP,是利用抗原A与蛋白B结合,通过A的抗体沉淀A,再利用精制的prorein A/G预先结合到磁珠上,使之与含有抗原的溶液及抗体反应后,磁珠上的proreininput是阳性对照。免疫共沉淀实验中,会直接取细胞裂解液进行WB,用于验证细胞裂解液中确实存在目的蛋白。阴性对照是用来排出污染的可能性,当阴性对照(即lgG对照)没有出现阳性说明
免疫共沉淀input组免疫共沉淀(immunoprecipitation,IP)是一种用于鉴定蛋白质复合物的实验技术。在免疫共沉淀实验中,首先需要制备特定抗体,并使用该抗体将目标蛋白质捕获。然与酵母双杂交技术不同,免疫共沉淀技术所利用的是抗原和抗体间的免疫反应,是一种基于体外非细胞的环境中研究蛋白质与蛋白质的相互作用的方法。不难看出,免疫共沉淀与免疫沉淀技术所
4、选择目的蛋白或相互作用蛋白含量高的样品进行免疫共沉淀实验。为此,Abbkine开发出通用型免疫(共)沉淀(IP/Co-IP)工具箱,经精心设计钻研,作为IP/Co-IP的标准化产品,可满足大多数免疫共沉淀中的input是指什么?答:input是阳性对照。免疫共沉淀实验中,会直接取细胞裂解液进行WB,用于验证细胞裂解液中确实存在目的蛋白,即阳性对照。Co-ip
IP--免疫沉淀(immunoprecipitation),在CHIP试验中主要有两点意思:1)抗原蛋白质(靶蛋白,即所研究的input control是是对照的一种,在细胞裂完离心之后、加入抗体ip之前吸出来的细胞裂解液。可以在wb曝光时显示目的条带的位置以及比较不同泳道之间用于IP反应的细胞
通过比较input中的总蛋白质与免疫共沉淀后的蛋白质,可以确定免疫沉淀的效率和特异性。如果CO-IP实验的结果与input中的总蛋白质不符,则可能表明免疫沉淀存在非免疫共沉淀(Co-IP)实验原理当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X,那么与X在体内结合的